[quote="Walker_XXI в
сообщении #1303605"][quote="Alexey Lk в
сообщении #1302200"]
"При этом протяжённое нервное волокно заменяете на срез мозга" - все верно
"платиновые электроды - на стальные" - на серебрянные
"минеральное масло (диэлектрик, кстати, предотвращающий дегидрацию ткани) - на физраствор" - на минеральное, уже не раз говорил об этом
"вместо инъекции готового маркёрного раствора используете кристалл красителя" - инъекция ничего не менят, только снижает концентрацию маркера, и для инъекции в ядро мозга нужен еще и инъектор от Narishige за 1200€, а для кристалла нет. Не аргумент иными словами
"который ещё должен раствориться" - DiI не может не растворится в мембране клетки, это же и есть липид.
"является ли Ваш краситель катионом - неизвестно" - известно, смотрите формулу, это перхлорат. Более того он даже оседает на отрицательно заряженных мембранных белках что затрудняет его диффузию
"напряжение подаёте неизвестно с какого БП и совершенно бесконтрольно..." - как и авторы статьи))) сейчас у меня блок на 0-5А и 0-30V, что еще надо?
"Вы всё еще утверждаете что воспроизводите описанный эксперимент?" - да!
"Ещё в школе на химии дети узнают, что физические и химические свойства элемента в составе других веществ и в виде простого вещества кардинально отличаются" - странный аргумент)))
"Вы ж состав маркёра знаете? Отчего неизвестность?" - что будет с синтетическим липидом при электрохимической реакции? Я не знаю, но подозреваю что он перестанет быть липидом))) это вопрос отдельного исследования если что.
"Ну и по-хорошему, не надо бы маркёру быть в виде кристалла и с анодом контактировать" - и я про то, поэтому и нужны агар-агаровые блоки на физрастворе. Вы можете посоветовать альтернативу с лучшей проводимость? Я бы разные варианты опробовал.
"Отсутствие понимания физики процесса" - поэтому я писал здесь)
"А Ваше недоумение по этому поводу вызывает моё недоумение (мягко говоря)" - извините но это ваши проблемы)
[
"В статье утверждается, что в масле нерв держится в кондиции до 10 дней. Вы не согласны?" - конечно не согласен, подержите мясо в минеральном масле 10 дней и посмотрите что от него останется - его начнет уже плесень уничтожать которой масло не помеха. А вообще легко проверяется - помещением контроля с маркером в масло на время и потом смотрим уже на срезах под микросокпом что там с морфологией, я как раз так и собираюсь сделать.
"Нужно осознать, что электроды из неблагородных металлов - это не вариант, т.к. они вступают в электрохимическую реакцию с тканями нерва (мозга) и с электролитами" - уже решили что серебрянные.
[
"Для Ваших опытов токи более 800 мА не должны понадобиться. Хотя..." - у меня минимум 10мА, максимум 5А.
"А кто мешает измерить электропроводность? Вообще в подобных экспериментах такие вещи нужно измерять самостоятельно, а не полагаться на чьи-то результаты" - ну ок, померял тестером сопротивление, на 2М вышло значение 1.824. Я правда сомневаюсь что сопротивление тотального образуца именно так топорно меряется ну да ладно, нормальный протокол я еще поищу.
"Мозг - не столь однородная ткань, как отдельное нервное волокно" - нет, совсем нет. Мозг это скопление ядер связанных между собой в разных проекциях.
"Ионный состав и проводимость разных участков могут разниться. Нам же важны те участки и ткани, в которых ожидается диффузия маркёра. Они важны. Но не они могут давать основной вклад в проводимость" - и?
"Вы серьёзно? Обгорят? С чего электродам обгорать? Они вступят в электрохимическую реакцию с тканями и жидкостями мозга, что исказит результаты и ускорит разрушение тканей" - все хорошо, но и у авторов статьи концы нерва разрушались, для этого и нужен агар-агар на физрастворе по флангам.
"Причём не подсолнечное, а минеральное" - у меня как раз минеральное, с чего вы взяли про подсолнечное? И авторы об этом писали
"Такие вещи Вы должны измерять лично в своём эксперименте на своём оборудовании со своими электродами, а никак не брать из справочников (тем более с форумов)" - из справочников, уж извините.
"Иначе это не наука, а псевдонаука и профанация" - улыбнуло)
"Ну а ток - какой получится, зависит от образца. Чем меньше - тем лучше" - 10мА подойдет?
"Ток не важен в описанном выше смысле: в идеале его быть не должно, но какой получится - зависит от образца. Но ток надо контролировать: чтобы не поджарить образец, чтобы не спалить приборы, чтобы понимать, что всё идёт как надо (ток соответствует расчётному, нигде ничего дополнительно не замкнуло, нигде нет обрывов)" - но ток есть, и надо знать безопасные значения что бы не потерять образец.
"как мне кажется, сейчас основная Ваша проблема - это не электроды и растворы, а полное отсутствие элементарных знаний из смежных областей" - а я и не спорил, поэтому я здесь все и спрашиваю
"Берясь за исследование биологических тканей электрохимическим способом, Вы не знаете ни физики, ни электрохимии даже на уровне средней школы" - стоп секунду, речь была не о осследовании тканей электрохимическим способом а о повторении методики. Предложите свою схему - мне проверить ее не составит труда (только без платины ладно).
"И если быть честным, то Вы не пытаетесь проверить правдивость статьи или воспроизвести их результаты. Вы пытаетесь применить описанную там методику к своим исследованиям в других условиях. И тут немаловажно проверить, насколько эти другие условия приемлемы для данной методики" - а вот это в самую точку. Если описанные условия в статье работают только на нерве - то это провал. Но у них то не сработало, это я по фото сужу как биолог, я то знаю как выглядит ткань когда метод работает. Но концепция сама хорошая, ее и надо проверить.
-- 20.04.2018, 21:09 --[quote="wrest в
сообщении #1305963"][quote="Alexey Lk в
сообщении #1305948"]
"что померили сопротивление вы, вероятно, неправильно. Может, неисправен ваш мультиметр, а может вы буквы "м" и "к" на крутилке перепутали (а это разница в 1000 раз)" - я то же думаю что неправильно, сопротивление ткани так топорно не меряют, но наверняка есть протокол об этом. Буква была М, это точно. На к вообще ничего не происходило на всем диапазоне.
-- 20.04.2018, 21:12 --15 микроампер! И как мне добится со своим блоком таких значений????
-- 20.04.2018, 21:41 --Мне кстати любопытно, не отрицая важности исследования сопротивления ткани возникает вопрос - хотя может я чего не заметил? - а почему авторы статьи нигде не давали значений замеров сопротивления нерва? Какой никакой ориентир. Т.е ни силы тока, ни сопротивления в статье как я понимаю нет, но при этом как они справились. Беглый осмотр методик показывает (как я и думал) что тестером тут не обойтись. Проще найти лабу где этим занимаются и заказать измерение им.