Я задал здесь вопрос с целью проверить эту статью на достоверность, у меня есть все для этого корме электродов, но учитывая что я не думаю что этот метод с полем сработает - вкладыватся в дорогие электроды мне не хочется.
При этом протяжённое нервное волокно заменяете на срез мозга, платиновые электроды - на стальные, минеральное масло (диэлектрик, кстати, предотвращающий дегидрацию ткани) - на физраствор (электролит, дающий агрессивные продукты при электролизе), вместо инъекции готового маркёрного раствора используете кристалл красителя (который ещё должен раствориться; является ли Ваш краситель катионом - неизвестно), напряжение подаёте неизвестно с какого БП и совершенно бесконтрольно... Вы всё еще утверждаете что воспроизводите описанный эксперимент?
У меня тоже есть большие подозрения, что в Вашем случае метод с полем не сработает.
Метал (любой) - для биологической ткани это нехорошо, графит скажем так более естественен (ткань то ведь то же из углерода по сути состоит)
Странный аргумент. Ещё в школе на химии дети узнают, что физические и химические свойства элемента в составе других веществ и в виде простого вещества кардинально отличаются.
я не знаю что останется от маркера в случае если он будет контактировать с анодом - а он будет, какие там пойдут с ним электрохимические реакции неизвестно
Вы ж состав маркёра знаете? Отчего неизвестность? Ну и по-хорошему, не надо бы маркёру быть в виде кристалла и с анодом контактировать.
Цельный мозг вданном случае де факто будет выступать в качестве проводника, замыкающего цепь.
Отсутствие понимания физики процесса хотя бы на качественном уровне привело к тому, что в начале обсуждения Вы концентрировались на "замыкании цепи" любым способом. Ладно, в конце концов разобрались.
) от стального анода идет столько грязи что мне даже стремно, я пущу ток на 6 часов а потом посмотрю что останется от мозга но выглядит отвратно
мне с первых минут стало ясно - нервная ткань не выдержит таких нагрузок, там стальной электрод чернеет на глазах даже на малых напряжениях в 12 вольт.
уже понял что железо не вариант, я конечно думал что будет не очень но что настолько!
Ну какие нагрузки?
Электрод чернеет от реакции с продуктами электролиза. А Ваше недоумение по этому поводу вызывает моё недоумение (мягко говоря).
С точки зрения биологии нерв сохранит свойства в глицерине на время эксперимента?
Тут приходит на память фраза: "Если ничего не помогает, прочтите, наконец, инструкцию!"
В пресловутой статье читаем (п.2.3) писал(а):
Dehydration of the tissue during the tracing period was a concern throughout the experiments, in particular when thinner nerve samples were used. Initially, a silicone gel (Dow Corning * 7 Release Compound, Fisher Scientific) was used to coat the entire sample during the tracing period. However, dehydration still occurred for tracing periods greater than 2 days. Therefore samples were immersed in mineral oil during the tracing period. This proved effective against dehydration, allowing fields to be applied across samples for at least 10 days.
(Выделение моё.) Может "тупо" воспользоваться результатами предыдущих исследователей?
1) биологическая ткань в масле необратимо деформируется - факт
масло это не вариант, с физраствором мне больше нравится если бы не продукты электролиза.
Вам нужно осознать, что в данном опыте физраствор - это не вариант. Физраствор - электролит с хорошей проводимостью, вам же нужен изолятор. Кроме того в физрастворе идёт электролиз, продукты которого агрессивны и разрушают нервную ткань почище любого масла. В статье утверждается, что в масле нерв держится в кондиции до 10 дней. Вы не согласны?
Нужно осознать, что электроды из неблагородных металлов - это не вариант, т.к. они вступают в электрохимическую реакцию с тканями нерва (мозга) и с электролитами. Это азы химии. Есть подозрение, что и графитовые электроды по каким-то причинам не очень годятся, иначе вместо платины все использовали бы копеечные электроды от батареек.
Важно также понимать, что какие-бы не были инертные электроды, продукты электролиза
никуда не денутся, если их не смывать.
Поэтому в описанном в статье эксперименте физраствор не использовали.
Связать (и контролировать) процесс диффузии с током а не с полем, по-моему, надёжнее.
Почему? Направленная диффузия обусловлена именно электрическим полем, напряжённость которого можно контролировать, а величина тока зависит от ряда слабо контролируемых факторов и напрямую не связана с напряжённостью поля в области диффузии.
важно понимать что, то, насколько сдвинется маркер будет зависеть от прошедшего заряда (время умножить на ток)
Это в идеале, если весь ток (заряд) идёт через нерв, а не как в опыте у ТС, через электролит вокруг нерва и дырки в кюветах.
Так на сколько ампер блок питания брать? 0.8 это много, а сколько не много? 200 миллиампер подойдет?
Я бы советовал изучить теорию процесса, раз уж Вы взялись за этот эксперимент. В теорию входит закон Ома: ток зависит от напряжения БП и сопротивления между электродами (т.е. проводимости нерва и тех растворов, которые соприкасаются с электродами и нервом). Грубо говоря, ток не зависит от БП (если у БП достаточно большая мощность). Указанное на БП значение (у Вас
) - это максимальное значение, которое способен выдать БП в течение длительного времени. При длительном/существенном превышении этого значения в хорошем БП сработает защита, а в плохом упадёт напряжение и появятся пульсации. Для Ваших опытов токи более 800 мА не должны понадобиться. Хотя...
я 200% даю что никто особо не изучал электропроводность мышиного мозга
мозг (с неизестным сопротивлением и электропроводностью),
Да ладно! А кто мешает измерить электропроводность? Вообще в подобных экспериментах такие вещи нужно измерять самостоятельно, а не полагаться на чьи-то результаты.
Если предположить (не знаю точно, но похоже на правду), что в мозгу основной ионный состав составляют как раз
и
, то ионный состав мозга меняться будет слабо.
А вот тут как раз следует воспользоваться чужими результатами, а не строить догадки. Уверен, что такие исследования проводились, химический и ионный состав мозга и нервных волокон известны. Тонкость, на мой взгляд, в другом. Мозг - не столь однородная ткань, как отдельное нервное волокно. Ионный состав и проводимость разных участков могут разниться. Нам же важны те участки и ткани, в которых ожидается диффузия маркёра. Они важны. Но не они могут давать основной вклад в проводимость.
Но тут вероятна другая засада -- ионы из физраствора будут идти через мозг, что возможно не очень хорошо (или даже наоборот -- совсем нехорошо).
+1
если напрямую приложить электроды к срезам, ну пусть обгорят
Вы серьёзно? Обгорят? С чего электродам обгорать? Они вступят в электрохимическую реакцию с тканями и жидкостями мозга, что исказит результаты и ускорит разрушение тканей.
Ну в статье то они дают только значение в 40V/см и ни слова про силу тока.
Услышьте, наконец, про закон Ома! При заданном напряжении ток определяется только проводимостью (сопротивлением) вашего образца, а вовсе не блоком питания. Если проводимость нервов (и мозга) на уровне дистиллированной воды, то никакой агар Вас не спасёт - только масло. Причём не подсолнечное, а минеральное.
На форуме физхимиков я попросил дать мне ссылку на электропроводность агар-агара
Такие вещи Вы должны измерять лично в своём эксперименте на своём оборудовании со своими электродами, а никак не брать из справочников (тем более с форумов). Иначе это не наука, а псевдонаука и профанация.
У меня сейчас ток на 0.8А, 50/60HZ, RS-35-12 и RS-35-48. Но Блок ЕС-400 я так понимаю имеет вариации в подаче миллиампер, и сколько именно подавали на нерв из сстатьи неясно
Снова не на то обращаете внимание. Диффузия обусловлена силой, которая действует на заряд (катион красителя) в электрическом поле. Сила эта зависит от напряжённости поля. Напряжённость поля зависит от приложенного напряжения и расстояния между электродами (вольты делить на сантиметры). Это всё, что нужно в идеале. В идеале никакого тока вообще не нужно. Ненулевой ток в данном случае - это паразитное побочное явление, обусловленное проводимостью тканей, наличием в них ионов. И этот ток разрушает ткань, а проводимость приводит к накоплению зарядов на концах ткани (срезах) и компенсации поля (о чём Вам писали на первых страницах). Это вынуждает идти на гальванический контакт и бороться/мириться с электролизом и с нагревом ткани током. Ну а ток - какой получится, зависит от образца. Чем меньше - тем лучше.
Тестер то у меня есть. Специалиста найти....судя по всему даже авторы статьи не тянут на это (не указали силу тока а должны были). Но разве этот форум не место для профессионалов? Мы уже почти дошли до дна, пределы ясны - 40 вольт и до 200 миллиампер, масло в качестве среды и агар на физрастворе по бокам с электродами из неблагородных металлов.
Но если кто знает специалиста по таким вопросам я скажу спасибо, но я сомневаюсь что такие есть в РФ, уж очень узкая тема.
Авторы статьи как раз понимают физику используемых явлений. В п.4 описан механизм. Понимая суть, они не акцентируют внимание на токе, зато контролируют напряжённость поля внутри нерва вспомогательными вольфрамовыми электродами (см. п.2). 40 вольт - это на сантиметр образца. У Вас другой образец и тут, как я писал, могут потребоваться другие напряжения, а паразитные токи могут оказаться большими (и образец поджарится). Специальные знания, как Вам уже писали, нужны на уровне физики средней школы. Такие "специалисты" в РФ ещё остались (хотя с каждым годом всё меньше).
И вообще не понятно - противоречивые мнения на форуме - одни говорят что сила тока не важна, другие что важна - у вас нет согласия даже в своих рядах. Так что тяжелый случай тут не у меня одного.
Сумбур у Вас от непонимания явления. Ток не важен в описанном выше смысле: в идеале его быть не должно, но какой получится - зависит от образца. Но ток надо контролировать: чтобы не поджарить образец, чтобы не спалить приборы, чтобы понимать, что всё идёт как надо (ток соответствует расчётному, нигде ничего дополнительно не замкнуло, нигде нет обрывов).
сейчас если я буду выяснять как мерять сопротивление нервной ткани я то мы точно тут все увязнем.
Снова средняя школа. Подключаете к образцу электроды и задаёте не очень большой ток (до 200 мА) при не очень большом напряжении (думаю, 12 В превышать не стоит) - начинайте с минимума напряжения и останавливайтесь, когда либо ток, либо напряжение достигнут указанного максимального значения. Снимаете показания напряжения и тока. Дальше - з-н Ома (формулы Вам выше написали).
Не важно какое сопротивление у нервной ткани - важно пустить ток только через мозг, и проверить будет ли идти диффузия маркера - работа не о цифрах которые ни один биолог читать не будет. В принципе я почти все ответы получил, дальше только опыт.
Как раз это важно, чтобы знать, какое напряжение прикладывать и какой ток при этом ожидать.
Вот что вычитал - нервная ткань действительно имеет электропроводность гораздо меньшую, чем межклеточная жидкость (а это физраствор), порядка на два. Хуже проводя ток только волосы, ногти и кости без надкостницы, что вообще практически изоляторы.
Alexey LkУпомянутая статья говорит, что для диффузии маркёра нужна определённая напряжённость поля. Вы берёте немного другую ткань, возможно с иной концентрацией ионов, с малым сопротивлением. В итоге получите большой ток (который поджарит ткань), но малую напряжённость поля, недостаточную для заметной диффузии маркёра. Я не биолог, поэтому не знаю отличия в строении ткани мозга от нервных волокон. Не похож ли используемый Вами препарат мозга на нервное волокно в агаре на основе физраствора? Если похож, то отсюда ясна причина высокой проводимости и ясно, что с маркёром вряд ли что выйдет.
Alexey Lk, как мне кажется, сейчас основная Ваша проблема - это не электроды и растворы, а полное отсутствие элементарных знаний из смежных областей. Берясь за исследование биологических тканей электрохимическим способом, Вы не знаете ни физики, ни электрохимии даже на уровне средней школы. Не нужно быть ни физиком, ни физикохимиком, но представлять на простейшем (школьном) уровне, какие процессы протекают, нужно. Сейчас же у Вас нет понимания даже на качественном уровне.
Второе - это техника и культура эксперимента. Все параметры, которые можно быстро и просто измерить самостоятельно, измеряете самостоятельно! Никаких проводимостей из справочников (и тем более форумов)! Это допустимо только на этапе планирования эксперимента, для прикидок, какое оборудование/препараты/реактивы потребуются, и чего приблизительно ожидать. И то зачастую проще провести предварительные оценочные замеры (т.к. разброс справочных значений может быть велик). В самом же эксперименте - только собственные измерения. Благо всё просто: ток, напряжение, делите одно на другое - вот вам проводимость.
И если быть честным, то Вы не пытаетесь проверить правдивость статьи или воспроизвести их результаты. Вы пытаетесь применить описанную там методику к своим исследованиям в других условиях. И тут немаловажно проверить, насколько эти другие условия приемлемы для данной методики.
(nds)
Никогда не думал, что нервы бывают такими толстыми (до 8 мм в диаметре?).
Где Вы такое прочитали?
Journal of Neuroscience Methods 141 (2005) 155–163, п.2.1 писал(а):
Median and ulnar nerve samples (diameters of 3–4 mm) wereused